Τα τελευταία Βενετικά τείχη των Χανίων ξεκίνησαν να χτίζονται το 1536 από τον Sammicheli, τον ίδιο αρχιτέκτονα που σχεδίασε και τα τείχη του Ηρακλείου. Τα τείχη στα Χανιά έχουν περίπου τετράγωνο σχήμα με τέσσερις επάλξεις και δύο πόρτες. Μέσα από τα τείχη βρισκόταν ένα δεύτερο οχυρό που περιέβαλλε το Καστέλι, όπου υπήρχε ένας μεγάλος αριθμός Βενετικών παλατιών. Τα Χανιά είχαν πάντοτε επάρκεια νερού για τους κατοίκους τους. Το 1645, μετά από δύο μήνες Τουρκικής πολιορκίας και ηρωικών μαχών, τα τείχη κοντά στο οχυρό Σιάβο (Shiavo, νοτιοδυτικό οχυρό) έπεσαν και η πόλη κυριεύτηκε. Σήμερα τα Βενετικά τείχη είναι ορατά σε πολλά σημεία γύρω από την πόλη.